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Zamboni固定液使用原理
更新時(shí)間:2023-03-16   點(diǎn)擊次數(shù):450次

Zamboni固定液使用原理


Zamboni-固定液(Zamboni Fluid)主要由PA、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,PA可沉淀蛋白引起組織收縮,但不會(huì)使組織硬化, 其與甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均勻,組織收縮輕微,對(duì)細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)顯示的很清晰,為一種良好的固定液。

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說明:固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。

用途:Zamboni-固定液是常用的混合型固定液之一,該固定液適用于電鏡免疫細(xì)胞化學(xué),對(duì)超微結(jié)構(gòu)的保存較純甲醛為優(yōu),也適用于光鏡免疫細(xì)胞化學(xué)的研究。固定時(shí)間為6-18小時(shí)。


操作步驟:(僅供參考)

1. 按實(shí)驗(yàn)具體要求操作。

2. 一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間,但不宜超過24h。

3. 固定后組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉(zhuǎn)入 70%的乙醇脫水,經(jīng)乙醇脫水時(shí)可除去大部分PA,組織留有一點(diǎn)黃色,對(duì)染色也無影響。



微波輻射固定組織。

組織固定的結(jié)果是組織中的蛋白質(zhì)凝固,以保存組織中原有的微細(xì)結(jié)構(gòu)。常規(guī)固定用的是甲醛或酒精等。但是這些固定劑從某些方面來說其穿透力不很強(qiáng),因而需要較長(zhǎng)時(shí)間的固定,另者,臨床上的冰凍切片,有的應(yīng)用快速加熱法預(yù)先固定組織,造成福爾馬林的極度揮發(fā),污染環(huán)境,影響人們的身體健康,因此尋找其它固定組織的方法就成為研究的重點(diǎn)。微波輻射固定組織,就是在這種情況下產(chǎn)生的。微波是一種具有能量的電磁波,在其運(yùn)動(dòng)期間可產(chǎn)生瞬間熱。由于微波的快速運(yùn)動(dòng),也導(dǎo)致了物體部極性分子的快速運(yùn)動(dòng),產(chǎn)生了熱量,致使組織蛋白凝固,因此,舊的叫法稱微輻射固定組織。按實(shí)際的應(yīng)稱為微波輻射凝固蛋白。








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